影響電泳加工程度的因素
1.電滲效應
在支持物的電泳中,影響電泳的另一個重要因素是電滲效應。電滲是指液體在電場中相對於固體支持物的運動。比如在pH8.6,dangxueqingdanbaitingzhizhidianyongshi,bingzhongqiudanbaiheqitadanbaiyiyang,daifudian,yinggaixiangzhengjiyidong,danquexiangfujiyidong,zhejiushidianshendezuoyong。daifudianhedelvzhixianweizhijianyouxuduoxiaokong,ruyishumaoxixueguan,danbaizhizaitingzhidianyongshitongguozhexiexiaokongxiangqianyidong。
孔kong隙xi帶dai負fu電dian,可ke以yi像xiang帶dai電dian粒li子zi一yi樣yang吸xi引yin正zheng離li子zi,所suo以yi介jie質zhi沿yan管guan壁bi的de相xiang對dui區qu域yu帶dai有you更geng多duo的de正zheng電dian荷he。在zai電dian場chang中zhong,帶dai負fu電dian的de蛋dan白bai質zhi向xiang正zheng電dian極ji移yi動dong,而er介jie質zhi向xiang相xiang反fan的de陰yin極ji移yi動dong,從cong而er阻zu礙ai了le蛋dan白bai質zhi顆ke粒li的de電dian泳yong處chu理li。
由於γ球蛋白分子粒徑大、淨電荷少、移動速度慢,電滲作用大於粒子正向電泳處理的力,γ球qiu蛋dan白bai的de作zuo用yong是shi後hou退tui。而er對dui於yu其qi他ta血xue清qing蛋dan白bai,由you於yu分fen子zi較jiao小xiao,淨jing電dian荷he較jiao多duo,電dian滲shen效xiao應ying小xiao於yu分fen子zi向xiang前qian運yun動dong的de力li,所suo以yi分fen子zi向xiang前qian運yun動dong。因yin此ci,血xue清qing蛋dan白bai電dian泳yong後hou,球qiu蛋dan白bai反fan而er落luo後hou於yu斑ban點dian方fang向xiang。
2.溶液的離子強度
溶(rong)液(ye)的(de)離(li)子(zi)強(qiang)度(du)是(shi)另(ling)一(yi)個(ge)重(zhong)要(yao)的(de)選(xuan)擇(ze)條(tiao)件(jian),在(zai)滿(man)足(zu)緩(huan)衝(chong)能(neng)力(li)的(de)前(qian)提(ti)下(xia),離(li)子(zi)強(qiang)度(du)要(yao)小(xiao)。溶(rong)液(ye)的(de)離(li)子(zi)強(qiang)度(du)越(yue)高(gao),帶(dai)電(dian)粒(li)子(zi)的(de)電(dian)泳(yong)處(chu)理(li)速(su)度(du)越(yue)慢(man),反(fan)之(zhi)亦(yi)然(ran)。高(gao)濃(nong)度(du)的(de)緩(huan)衝(chong)溶(rong)液(ye)具(ju)有(you)較(jiao)低(di)的(de)電(dian)阻(zu)和(he)較(jiao)高(gao)的(de)電(dian)流(liu),並(bing)在(zai)適(shi)當(dang)的(de)電(dian)壓(ya)下(xia)產(chan)生(sheng)較(jiao)高(gao)的(de)熱(re)量(liang)。假(jia)設(she)額(e)定(ding)熱(re)可(ke)以(yi)溶(rong)解(jie),高(gao)濃(nong)度(du)緩(huan)衝(chong)液(ye)的(de)弛(chi)豫(yu)常(chang)數(shu)較(jiao)低(di),會(hui)產(chan)生(sheng)較(jiao)窄(zhai)的(de)電(dian)泳(yong)帶(dai)。當(dang)離(li)子(zi)強(qiang)度(du)很(hen)高(gao)時(shi),應(ying)使(shi)用(yong)低(di)電(dian)壓(ya),以(yi)避(bi)免(mian)過(guo)度(du)發(fa)熱(re),導(dao)致(zhi)電(dian)泳(yong)時(shi)間(jian)長(chang),難(nan)以(yi)分(fen)別(bie)增(zeng)加(jia)變(bian)性(xing)和(he)區(qu)帶(dai)。3.溶液的酸堿度。
溶液的酸堿度選擇帶電粒子的解離水平,也選擇物質的淨電荷。對於蛋白質、氨基酸等電解質,溶液pH值離電點越遠,顆粒淨電荷越多;電泳速度越快;否則,速度越慢。比如血清中幾種主要蛋白質的等電點不同,白蛋白的等電點為4.0。α球蛋白的等電點為5.06,β球蛋白為5.1,γ球蛋白為7.1。在pH8.6電泳緩衝液中進行電泳時,這些蛋白質都帶負電荷,其電泳處理速度為白蛋白